التحليل الكروماتوغرافي

الكروماتوغرافيا Chromatography
هي إحدى طرق فصل وتشخيص المركبات العضوية وتعني كلمة كروماتوغرافيا قديماً فصل المركبات الملونة , حيث كانت تقنية الكروماتوغرافيا البسيطة تستخدم لفصل النواتج الطبيعة للنباتات والتي تكون ملونة .
تقسم الكروماتوغرافيا إلى :
1) كروماتوغرافيا الصفائح .
2)كروماتوغرافيا الأعمدة .
تقسم كروماتوغرافيا الصفائح إلى :
1)الكروماتوغرافيا الورقية .
2) كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة .
الكروماتوغرافيا الورقية :
في هذا النوع من الكروماتوغرافيا يتم الفصل للمركبات باستخدام طورين هما
1)الطور المتحرك ( Mobile phase ) : ويكون مادة سائلة عادةَ
2)الطور الساكن ( Stationary phase ) : ويكون في الغالب سائل أيضاً محمول على الألياف السليلوزية للورقة , لذلك يطلق عليها أسم كروماتوغرافيا الورق .
أنواع الورق المستخدم في الكروماتوغرافيا الورقية :
1.الأوراق المشبعة بالمحاليل العضوية .
2.أوراق التبادل الأيوني .
3.أوراق كارهة للماء .
4.الأوراق ذات البعدين .
بعض أنواع الأطوار المتحركة المستخدمة في الكروماتوغرافيا الورق
1.كحول البيوتانول المشبع بحامض الهيدروكلوريك .
2.استيل أسيتون المشبع بالماء .
3.حامض الخليك الثلجي الحاوي على ( 5% ) من كحول الميثانول
4.اثيل - مثيل كيتون .
5.كحول الميثانول .
ويستفاد من تقنية كروماتوغرافيا الورق في تشخيص المركبات العضوية فقط , حيث يمكن معرفة قيمة عامل الإعاقة ( Rf ) للمركبات , ومن ثم مقارنته مع عامل الإعاقة للمركب القياسي ( المعروف الهوية ) فإذا تطابق كان المركب مماثل للمركب القياسي أي إن عامل الإعاقة( Rf ) هو مقياس لسرعة حركة المكون نسبة إلى جبهة الطور المتحرك . ويتم قياس المسافة اعتبارا من خط الابتداء, أي من مركز البقعة ( النموذج الذي على الورقة ) أي جبهة الطور المتحرك كما في الشكل .
وكذلك الكروماتوغرافيا - هي كلمة مكونة من مقطعين: كرومو وتعني لون, وغرافيا وتعني كتابة. وقد سميت بهذا الاسم لأسباب تاريخية حيث كانت تستعمل في البداية لفصل المواد الملونة...
إما اليوم فإن الكروماتوغرافيا تضم في جعبتها الكثير من الطرق للفصل, يجمعها شيء واحد أساسي ألا وهو وجود شيئين اثنين في التجارب: الجزء الثابت والجزء المتحرك...
في عملية الفصل الكروماتوغرافي نضع قليلا من المخلوط الذي نود فحصه وذلك على الجزء الثابت, ومن ثم نضع هذا الجزء الثابت في سائل يكون عبارة الجزء المتحرك. حيث يقوم السائل بالسريان جارا معه المخلوط ...بطبيعة الحال ليست كل المواد ذات نفس سرعة الحركة على الجزء الثابت وذلك يرجع إلى عاملين اثنين رئيسيين:
1- ميل المادة إلى الالتصاق بالجزء الثابت.
2 - ميل المادة إلى الذوبان في الجزء المتحرك.
إذا لم تكن المادة قابلة للذوبان في الجزء المتحرك, أو إنها لا تلتصق بالجزء الثابت فإن عملية الفصل الكروماتوغرافي مستحيلة.
وبما أن المخلوط المراد فحصه عبارة عن مواد ذات ألفة كيماوية (ميل للالتصاق) مختلفة للجزء الثابت, وذات قدرة مختلفة على الذوبان في المذيبات المختلفة, فإن النتيجة تكون الفصل الفيزيائي بين المواد المكونة للمخلوط وذلك على سطح الجزء الثابت. وهكذا يمكن جمع المواد كل على حدة وفحص صفاتها وكمياتها...

أنواع الطرق الكروماتوجرافيه
ينقسم التحليل الكروماتوجرافي إلى ثلاثة أنواع
· كروماتوجرافي الامتزاز
· كروماتوجرافي التبادل الأيوني
· كروماتوجرافيا التجزئة *
· كروماتوجرافيا المنخلية
· كروماتوجرافيا الكهربائي